精品国产综合久久久久久国,日韩人妻一区,99亚洲精品一区二区三区,大鸡巴 操 在线 视频

歡迎進入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網站!
13482402338
技術文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁  -  技術文章  -  神經上皮瘤細胞;SK-N-MC實驗報告

神經上皮瘤細胞;SK-N-MC實驗報告

更新時間:2024-05-30點擊次數:2495

神經上皮瘤細胞;SK-N-MC實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


TEL:021-61210612

掃碼加微信

国产偷v国产偷v亚洲高清学生| 国产精品福利一区二区久久| 波多野吉衣中文字幕一区| 伦理片在线观看| 岛国三级片在线观看网站| 成人av在线播放亚洲高清| 无码人妻精品一区二区三区| 日本人妻中文字幕在线视频| 亚洲AV无码码潮喷在线观看 | 久久亚洲美女精品国产精品| 亚日韩精品人妻无码视频| 免费高清日韩在线观看视频| 欧美乱欲乱爱视频在线观看| 最近中文字幕在线中文一页| 久久久动漫精品| 亚洲av成人在线一区二区| 国自产精品手机在线视频| 亚洲国产精品线在线观看| 国产精品va在线儿播放| 9re视频这里只有精品| 久久一区二区av免费观看| 成人在线日韩免费一卡二卡| av老司机福利精品导航| 人妻va精品va欧美va| 韩国日本欧美久久久久久| 精品精品国产日韩26u| 国产精品熟女福利久久av| 久久综合噜噜激激的五月天| 亚洲一区二区三区四区影院 | 国产真实younv在线| 国产精品国产三级国产专业| 久久久久无码精品亚洲日韩| 国产精品久久久久久87| 日视频在线观看免费日a| 久久久国产精品亚洲无码| 制服诱惑中文字幕国产精品| 午夜福利不卡片在线播放| 性欧美大战久久久久久久| 国产99久久久久久免费| 久久久精品一区aaa片| 97在线观看视频在线观看|